122799品牌PerkinElmer/Revvity小動物活體成像底物操作使用

活體成像技術(shù)（optical in vivo imaging）目前主要采用生物發(fā)光（bioluminescence）與熒光（fluorescence）兩種技術(shù)，生物發(fā)光法是基于熒光素酶能催化底物（D-Luciferin或Coelenterazine）化學(xué)發(fā)光的原理，將體外能穩(wěn)定表達(dá)熒光素酶的細(xì)胞株植入動物體內(nèi)，與后期注射入體內(nèi)的底物發(fā)生反應(yīng)，利用光學(xué)系統(tǒng)檢測光強(qiáng)度，間接反映出細(xì)胞數(shù)量的變化或細(xì)胞的定位。這項技術(shù)已被廣泛應(yīng)用于多個領(lǐng)域，常用的有腫瘤或疾病動物模型的建立，并可用于病毒學(xué)研究、siRNA研究、干細(xì)胞研究、蛋白質(zhì)相互作用研究等。

1.D-Luciferin, Sodium Salt/D-熒光素鈉鹽、

2.D-Luciferin, Potassium Salt/D-熒光素鉀鹽

3.D-Luciferin Firefly,free acid/D-螢火蟲熒光素

常用且代表性產(chǎn)品為D-Luciferin, Potassium Salt/D-熒光素鉀鹽，貨號是122799，品牌是PerkinElmer/Revvity。現(xiàn)貨代理商是靶點科技。常年現(xiàn)貨，隨時發(fā)貨。技術(shù)咨詢和產(chǎn)品說明書聯(lián)系我們技術(shù)部。

122799品牌PerkinElmer/Revvity小動物活體成像底物操作使用

D-Luciferin, Potassium Salt/D-熒光素鉀鹽

分子式：NaC11H7N2O3S2·H2O

分子量：320.32 g/mol

應(yīng)用：

1）活細(xì)胞、組織或生物體內(nèi)luc標(biāo)記基因和熒光素酶-融合基因體內(nèi)/體外表達(dá)的成像分析；
2）廣泛用于報告基因分析，免疫分析和ATP熒光衛(wèi)生監(jiān)測分析；

Protocol 1：In Vitro Bioluminescent Assays/ 體外生物發(fā)光檢測
1）配制成100 mM的儲存液（200×，濃度30mg/ml）。混勻后立即使用或分裝后-20℃凍存。
2）用預(yù)熱好的組織培養(yǎng)基1∶200稀釋儲存液，配制工作液(終濃度150μg/mL)。
3）去除培養(yǎng)細(xì)胞的培養(yǎng)基直至無殘留。
4）圖像分析前立即向細(xì)胞內(nèi)添加1×熒光素工作液，然后進(jìn)行IVIS成像系統(tǒng)圖像分析（或者細(xì)胞放在37℃短時間孵育后檢測可增強(qiáng)信號）。

Protocol 2：In vivo analysis in mice / 小鼠活體成像分析
1）用無菌的DPBS（w/o Mg2+、Ca2+）配制D-熒光素鉀鹽溶液(15mg/mL)，0.2um濾膜過濾除菌。一旦使用，保持冰冷且避光。
2）按10 μL/g體重的濃度向每支小鼠注射相應(yīng)量的15mg/mL熒光素溶液；
3）腹腔注射10-15 min后，IVIS成像系統(tǒng)進(jìn)行成像分析。（對每只動物模型做熒光素動力學(xué)研究以確定峰值信號獲取時間）