BrainBits培養(yǎng)基Hibernate A培養(yǎng)神經(jīng)組織文獻(xiàn)參考解決方案

?BrainBits? 是一家專注于提供神經(jīng)生物學(xué)研究產(chǎn)品的公司，主要產(chǎn)品包括活體腦組織、轉(zhuǎn)染培養(yǎng)基及神經(jīng)細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒等，廣泛應(yīng)用于科研領(lǐng)域。靶點科技為BrainBits在中國的代理，提供進(jìn)口試劑、生物耗材及技術(shù)服務(wù)，覆蓋分子生物學(xué)、免疫學(xué)等領(lǐng)域 。 ?

核心產(chǎn)品

活體腦組織：提供新鮮離體神經(jīng)元，支持快速開展實驗 。 ?如Brainbits Hibernate A培養(yǎng)基。

小鼠小腦培養(yǎng)試劑盒：包含THRYVE胚胎培養(yǎng)基、NbActiv1™等，支持神經(jīng)元體外培養(yǎng)，4天可見軸突，7天形成突觸 。 ?如brainbits Hibernate E培養(yǎng)基。

中國代理

靶點科技為BrainBits在中國的代理，提供進(jìn)口試劑、生物耗材及技術(shù)服務(wù)，覆蓋分子生物學(xué)、免疫學(xué)等領(lǐng)域 。 ?

應(yīng)用場景

神經(jīng)科學(xué)研究：如神經(jīng)元分化、突觸形成等 。 ?

藥物篩選：用于神經(jīng)退行性疾病相關(guān)研究 。 ?

Brainbits Hibernate A培養(yǎng)基是一種不依賴于 CO₂ 的營養(yǎng)培養(yǎng)基，用于維持神經(jīng)細(xì)胞、組織和組織切片。Hibernate A 培養(yǎng)基已進(jìn)行優(yōu)化，可用于在環(huán)境二氧化碳水平中維持成熟和不成熟細(xì)胞或組織。Brainbits Hibernate 培養(yǎng)基可讓神經(jīng)元在環(huán)境 CO2 水平下維持長達(dá) 48 小時。這為科學(xué)家在運(yùn)行臺式活細(xì)胞實驗時提供更大的便利和控制，比如顯微鏡、流式細(xì)胞分析以及其他生理學(xué)研究。Brainbits Hibernate 培養(yǎng)基還可在冷藏環(huán)境下保存具有活性的大腦組織直至處理達(dá) 1 個月，以及維持組織切片。

BrainBits培養(yǎng)基Hibernate A培養(yǎng)神經(jīng)組織文獻(xiàn)參考解決方案

英文標(biāo)題： A Patient-Derived Glioblastoma Organoid Model and Biobank Recapitulates Inter- and Intra-tumoral Heterogeneity

中文標(biāo)題：一種來源于患者的膠質(zhì)母細(xì)胞瘤類器官模型和生物銀行，概括了腫瘤間和腫瘤內(nèi)的異質(zhì)性

發(fā)表日期：9 January 2020

所屬期刊：Cell

患者膠質(zhì)母細(xì)胞瘤樣本的收集、解剖和處理（Collection, Dissection, and Processing of Patient Glioblastoma Samples）

材料和方法

1.新鮮手術(shù)切除的膠質(zhì)母細(xì)胞瘤組織被置于無菌磷酸鹽緩沖鹽水中，并立即送往賓夕法尼亞大學(xué)病理學(xué)系，由主治病理學(xué)家（M.N.）確認(rèn)高級別膠質(zhì)瘤的初步診斷。

2.在有大塊整體組織可用的情況下，組織被細(xì)分為解剖學(xué)上不同的亞區(qū)，用于分析腫瘤內(nèi)異質(zhì)性。

3.在確認(rèn)膠質(zhì)母細(xì)胞瘤的初步診斷后，組織被分配并置于保持在4°C的Hibernate A培養(yǎng)基（BrainBits）中。

4.為了可靠地生成類器官，必須立即處理組織，因為手術(shù)切除與組織處理之間的長時間間隔會降低GBO生成的可靠性。

5.組織被轉(zhuǎn)移到一個無菌玻璃盤中，其中含有H+GPSA培養(yǎng)基和Hibernate A、1X GlutaMax（Thermo Fisher Scientific）、1X PenStrep（Thermo Fisher Scientific）以及1X兩性霉素B（Thermo Fisher Scientific），在層流生物安全柜內(nèi)的顯微鏡（Zeiss）下進(jìn)行解剖。

6.接收的膠質(zhì)母細(xì)胞瘤組織體積從0.5到2 mL不等。

7.切除的腫瘤被細(xì)剪成大約0.5到1 mm直徑的小塊，使用精細(xì)解剖剪（Fine Science Tools）并在H+GPSA培養(yǎng)基中洗滌，以去除細(xì)胞碎片。

8.移除了含有大量壞死或周圍腦組織的碎片。

9.腫瘤塊在1X RBC裂解緩沖液（Thermo Fisher Scientific）中溫和旋轉(zhuǎn)孵化10分鐘，以裂解大部分污染的紅細(xì)胞。

10.RBC裂解緩沖液被抽吸掉，腫瘤塊用H+GPSA培養(yǎng)基洗滌。

11.幾塊腫瘤組織快速冷凍，用于批量RNA測序和全外顯子測序。

12.為了進(jìn)行組織學(xué)研究，將幾塊腫瘤組織直接置于4%甲醇免費甲醛（Polysciences）中，該甲醛稀釋于DPBS（Thermo Fisher Scientific）中，室溫下輕輕旋轉(zhuǎn)固定1小時。

13.固定后，腫瘤塊用DPBS洗滌，并通過在4°C下在DPBS中的30%蔗糖（Sigma-Aldrich）中過夜孵育來進(jìn)行冷凍保護(hù)。

14.腫瘤塊被置于塑料冷凍模具（Electron Microscopy Sciences）中，并在干冰上的組織冷凍介質(zhì)（General Data）中快速冷凍。

15.冷凍組織儲存在-80°C，直至處理。