皮膚巨噬細(xì)胞流式圈門策略解決方案

皮膚巨噬細(xì)胞是皮膚組織損傷后免疫反應(yīng)的主要效應(yīng)細(xì)胞。皮膚中主要有兩大類免疫細(xì)胞：DC細(xì)胞和巨噬細(xì)胞。皮膚被一層基膜分為了表皮和真皮，真皮層中的細(xì)胞相對來說更為復(fù)雜，包括：真皮層中駐留的cDC細(xì)胞（來源于真皮層血管中的pre-cDC細(xì)胞）、血管中Ly6Chi的單核細(xì)胞外滲出血管后可分化為單核源的DC細(xì)胞和真皮巨噬細(xì)胞。表皮層主要是朗格漢斯細(xì)胞（LCs），其來源于卵黃囊。因此，皮膚中的巨噬細(xì)胞分為兩大類：表皮層的朗格漢斯細(xì)胞和真皮層的真皮巨噬細(xì)胞。

皮膚巨噬細(xì)胞在皮膚損傷修復(fù)，瘢痕的不同階段，根據(jù)局部微環(huán)境的不同會發(fā)生明顯的表型和功能改變。巨噬細(xì)胞在瘢痕形成中顯著的作用是通過分泌基質(zhì)金屬蛋白酶(MMPs)直接或間接的影響瘢痕的形成。巨噬細(xì)胞在傷口愈合的組織修復(fù)和再生中起著重要作用。早期階段：M1型巨噬細(xì)胞主要分布在創(chuàng)傷早期，而M2型巨噬細(xì)胞主要分布在創(chuàng)傷晚期和增生性瘢痕的增生期。在皮膚傷口愈合中，M1型巨噬細(xì)胞的數(shù)量在7-14天達(dá)到峰值，而在增厚性瘢痕組織中，M2型巨噬細(xì)胞的數(shù)量在14-28天增加。巨噬細(xì)胞在皮膚創(chuàng)傷修復(fù)的不同階段表現(xiàn)出不同的功能。若創(chuàng)傷炎癥期延長，可能會導(dǎo)致瘢痕形成。在傷口微環(huán)境中，巨噬細(xì)胞可誘導(dǎo)成纖維細(xì)胞增殖、肌成纖維細(xì)胞分化和膠原沉積。巨噬細(xì)胞數(shù)量和表型的改變可以干擾傷口愈合的過程，并決定瘢痕形成的程度。

如何分離皮膚巨噬細(xì)胞？如何驗(yàn)證用流式方法圈門確認(rèn)分離的皮膚巨噬細(xì)胞？可以參考如下文獻(xiàn)的方法和數(shù)據(jù)。

皮膚巨噬細(xì)胞流式圈門策略解決方案

a. 皮膚巨噬細(xì)胞代表性的流式細(xì)胞術(shù)門控策略，在設(shè)門 CD11b、F4/80 細(xì)胞之前，排除 Ly6G 中性粒細(xì)胞和 SiglecF 嗜酸性粒細(xì)胞。b.Ly6C 在 F4/80 高/低亞群中的表達(dá)，表明這些標(biāo)志物表達(dá)呈負(fù)相關(guān)。F4/80 High的巨噬細(xì)胞，高表達(dá)Ly6C Low，比例約為80%；F4/80 Low的巨噬細(xì)胞，高表達(dá)Ly6C High，比例約為80%。

論文信息：

論文題目：Local administration of regulatory T cells promotes tissue healing

期刊名稱：Nature Communications

時間期卷：15, Article number: 7863 (2024)

在線時間：2024年9月9日

DOI：doi.org/10.1038/s41467-024-51353-2

如果需要清除巨噬細(xì)胞，巨噬細(xì)胞清除產(chǎn)品信息：

貨號：CP-005-005

規(guī)格：5ml+5ml

品牌：Liposoma

產(chǎn)地：荷蘭

名稱：Clodronate Liposomes and Control Liposomes

辦事處：Target Technology（靶點(diǎn)科技）

Macrophage depletion by CL

Ten-week-old male wildtype C57BL/6J mice received intraperitoneal injections of clodronate encapsulated in liposomes or control PBS liposomes (200?μl of 5?mg/ml) (Liposoma B.V., CP-005-005) 1 day before injury. Injections continued every other day until day 7 post-injury to deplete macrophages. Efficiency of macrophage depletion was validated by assessing F4/80+ macrophage levels within the CD11b+ myeloid cell population in spleen using flow cytometry.