附睪白色脂肪組織 （eWAT）巨噬細胞在高脂誘導肥胖模型氯膦酸二鈉脂質體清除解決方案

在對瘦和肥胖小鼠的附睪白色脂肪組織 （Epididymal white adipose tissue：eWAT） 進行表達芯片分析時，spp1（分泌的磷蛋白 1 或骨橋蛋白，OPN）是飼喂高脂飲食 （HFD） 12 周的小鼠中上調最高的基因（~28 倍）。OPN 增加介導 ATM 向 eWAT15 的募集。OPN 主要由成骨細胞和骨細胞分泌，是骨骼細胞外基質中豐富的非膠原磷蛋白。它用于調節基質礦化和骨細胞（骨細胞和破骨細胞）附著。OPN 高度集中在骨水泥線上，其中殘留和新形成的骨在骨細胞和底層破骨細胞周圍的限制層結構（細胞-基質相互作用）的骨表面整合（礦物-基質相互作用）。

在高脂飲食 （high-fat diet：HFD） 誘導的肥胖中，附睪白色脂肪組織 （Epididymal white adipose tissue：eWAT） 分泌一系列細胞因子來調節器官和組織的代謝，但其對骨代謝的影響尚不清楚。在這里，我們報道了 eWAT 中的巨噬細胞是骨橋蛋白的主要來源，骨橋蛋白選擇性地循環到骨髓并通過激活破骨細胞來促進骨基質的降解，以及調節骨髓衍生的巨噬細胞 （BMDM） 以吞噬小鼠骨髓中脂肪細胞釋放的脂滴。然而，骨橋蛋白調節誘導的乳酸積累通過限制溶酶體中 ATP6V0d2 的能量再生來阻斷 BMDMs 中的脂肪分解和破骨細胞生成。手術切除 eWAT 和局部注射氯膦酸鹽脂質體 （用于清除巨噬細胞） 或骨橋蛋白中和抗體均顯示出對 HFD 誘導的小鼠骨質流失的改善。這些結果為開發緩解肥胖相關骨骼疾病的治療策略提供了一條途徑。

研究背景：分別選取高脂飲食組 (HFD)和正常飲食組（NFD）的小鼠附睪白色脂肪組織 （Epididymal white adipose tissue：eWAT）。巨噬細胞是eWAT中的主要免疫細胞，基于基因表達，巨噬細胞可進一步分為：血管周樣巨噬細胞(C1, PVM)，非血管周樣巨噬細胞(C3, NPVM)，脂質相關巨噬細胞(LAM, C2)，proliferative LAM (C5, P-LAM)，膠原表達巨噬細胞(C4, CEM)和調節性巨噬細胞(C6, RM)。與對照組相比，高脂飲食誘導的肥胖導致LAMs和P-LAMs數量急劇增加，NPVMs和PVMs數量顯著降低。荷蘭liposoma巨噬細胞清除劑Clodronate Liposomes經過全球客戶的大量實驗驗證，塔尖客戶的選擇，頂刊Cell，Nature和Science的發表，正所謂Proven and published^®。附睪白色脂肪組織 （eWAT）巨噬細胞在模型中的增多，同時骨橋蛋白的共定位，表達增加，骨質情況的變化三者的關系研究期待躍然紙上。附睪白色脂肪組織 （eWAT）巨噬細胞在高脂誘導肥胖模型氯膦酸二鈉脂質體清除解決方案，使用荷蘭Liposoma巨噬細胞清除劑：Clodronnate Liposomes氯膦酸二鈉脂質體（CP-005-005）來清除巨噬細胞。論文信息和實驗數據如下。

論文信息：

論文題目：Macrophages in epididymal adipose tissue secrete osteopontin to regulate bone homeostasis

期刊名稱：Nature Communications

時間期卷：13, Article number: 427 (2022)

在線時間：2022年1月20日

DOI：doi.org/10.1038/s41467-021-27683-w

產品信息：

貨號：CP-005-005

規格：5ml+5ml

品牌：Liposoma

產地：荷蘭

名稱：Clodronate Liposomes and Control Liposomes

辦事處：Target Technology（靶點科技）

氯膦酸鹽脂質體清除附睪脂肪組織中的巨噬細胞，其分泌骨橋蛋白以調節骨穩態。氯膦酸鹽二鈉脂質體清除巨噬細胞在高脂誘導的肥胖（HFD）模型附睪脂肪組織和破骨細胞功能研究，荷蘭Liposoma巨噬細胞清除劑Clodronate Liposomes見刊于Nature Communications：

F4/80+ and CD11b+ macrophages in eWAT secrete OPN

Obesity induces macrophages to infiltrate the CLSs of eWAT, and the presence of these ATMs is closely correlated with lipid turnover and chronic systemic inflammation. It was unknown whether inhibition of these actions by depleting ATMs would be able to restore bone marrow homeostasis. After injection of clodronate liposomes (CL, 0.675?mg/unilateral/3 days, to clear the ATMs) into the bilateral eWAT for 8 weeks, infiltration of ATMs was significantly lower in the HFD-fed mice (HFD?+?CL) than the HFD-fed mice treated with control liposomes (HFD?+?Ctrl) (Fig. 4a, b). The progression of bone loss was attenuated, and rBMAT mass significantly decreased in the HFD?+?CL group compared with the HFD?+?Ctrl group (Fig. 4c–e). Together, these results suggest that obesity activates the ATMs of eWAT to influence bone marrow metabolism.

ATM(adipose tissue-derived macrophages： ATMs)depletion

The abdominal hair was shaved, and the skin was treated with betadine. ATMs were depleted by injecting clodronate liposomes (0.675?mg/unilateral/3 days, LIPOSOMA, Lot # C10E0218) into the bilateral eWAT under inhalation isoflurane without surgical incision every 3 days from 12 weeks of age. Mice were simultaneously fed an NFD or HFD for 8 weeks. The control group mice received the control liposome (LIPOSOMA, Lot# C14E0218).

注射方式：局部注射，注射到雙側附睪白色脂肪組織 （Epididymal white adipose tissue：eWAT）

注射頻頻：3天一次

注射劑量：0.675mg。clodronate Liposomes試劑濃度是5mg/ml。也是單側注射135ul。