氯膦酸鹽脂質(zhì)體Clodronate Liposomes清除巨噬細(xì)胞仍是優(yōu)選

巨噬細(xì)胞是先天性免疫系統(tǒng)的重要組成部分之一，具有促進(jìn)損傷愈合、產(chǎn)生活性氧物質(zhì)和吞噬異物的作用，其功能異常可引起機(jī)體免疫反應(yīng)失調(diào)或組織病理性損傷。巨噬細(xì)胞有組織定居型（駐留）和非組織定居型（招募）兩種細(xì)胞群體，其共有的顯著特征主要是具有分泌功能，包括分泌具有廣泛生物學(xué)功能的細(xì)胞因子、生長因子、免疫炎癥因子和趨化因子等。

巨噬細(xì)胞的另一特征是能夠表達(dá)特定的細(xì)胞表面標(biāo)志物如F4/80、CD68、iNOS和CD206等。非組織駐留的巨噬細(xì)胞主要分布于循環(huán)系統(tǒng)內(nèi)，而駐留型巨噬細(xì)胞則主要存在于各個(gè)組織器官中，如神經(jīng)系統(tǒng)的小膠質(zhì)細(xì)胞、肝臟Kupffer細(xì)胞、皮膚朗格漢斯細(xì)胞和腹腔的巨噬細(xì)胞等。

巨噬細(xì)胞的分化、增殖和極化依賴于特定的生長因子及其受體。巨噬細(xì)胞的表型受到其周圍微環(huán)境的影響，目前已鑒定出兩類極化表型的巨噬細(xì)胞：M1和M2表型細(xì)胞。M1表型細(xì)胞，也被稱為經(jīng)典激活的巨噬細(xì)胞，表達(dá)iNOS，釋放促炎細(xì)胞因子，如TNFα、IL-1b、IL-6和IL-12；而M2型巨噬細(xì)胞，即交替激活的巨噬細(xì)胞，表達(dá)CD206和Arg-1，負(fù)責(zé)釋放抗炎細(xì)胞因子，如IL-10。切記，M1和M2是為了研究方便，定義的巨噬細(xì)胞狀態(tài)天平的兩個(gè)端。實(shí)際研究實(shí)驗(yàn)中，沒有這么絕對(duì)。而是動(dòng)態(tài)變化的。

巨噬細(xì)胞表型與功能活性的這種多樣性和復(fù)雜性，使得巨噬細(xì)胞的體內(nèi)生物學(xué)研究存在一定困難。為解決這一問題，近年采用了一種稱為巨噬細(xì)胞耗竭/清除的方法來進(jìn)行研究。巨噬細(xì)胞耗竭/清除實(shí)際上是一種采用理化（GdCl3，Clodronate Liposomes）或遺傳學(xué)技術(shù)（基因敲除小鼠），以及抗體（CSF-1抗體）將巨噬細(xì)胞去除的方法。這些方法現(xiàn)已廣泛用于研究巨噬細(xì)胞在動(dòng)物疾病模型中的作用和免疫病理或炎癥損傷機(jī)制，也開始用于某些疾病模型如移植排異、腫瘤和疾病模型等的治療研究。

脂質(zhì)體是具有雙層磷脂膜結(jié)構(gòu)。其生物相容性好，不會(huì)引起抗原、熱原、過敏和毒性反應(yīng)，易被生物降解，能夠封裝活性藥物，因此被作為載體廣泛地應(yīng)用于藥物遞送。其中，氯膦酸鹽脂質(zhì)體法Clodronate Liposomes是目前廣泛認(rèn)可的巨噬細(xì)胞耗竭方法。自從荷蘭科學(xué)家Nico van Rooijen于1983年發(fā)明clodronate liposomes以來，其迅速取代GdCl3和抗體，以及基因敲除小鼠，成為廣泛認(rèn)可的清除單核巨噬細(xì)胞的方法。目前荷蘭liposoma品牌（國內(nèi)辦事處：靶點(diǎn)科技）的產(chǎn)品氯膦酸鹽脂質(zhì)體Clodronate Liposomes，巨噬細(xì)胞清除套裝，貨號(hào)CP-005-005，已經(jīng)頻繁被國際頂刊cell、nature和sciences引用。

在體內(nèi)，脂質(zhì)體包裹的氯膦酸鹽可被巨噬細(xì)胞吞噬并攝入細(xì)胞內(nèi)，此時(shí)細(xì)胞內(nèi)的溶酶體磷脂酶會(huì)消化磷脂雙層，釋放其中的氯膦酸鹽分子。細(xì)胞內(nèi)的氯膦酸鹽達(dá)到某一閾值濃度時(shí)，可抑制ATP依賴性酶，損害并破壞細(xì)胞能量代謝，導(dǎo)致巨噬細(xì)胞凋亡。此外，氯膦酸鹽半衰期很短，也難以透過細(xì)胞膜，對(duì)非吞噬細(xì)胞無明顯毒性作用，故通過選擇給藥途徑可以獲得器官特異性的巨噬細(xì)胞消耗。例如，皮下注射氯膦酸鹽脂質(zhì)體能夠耗竭小鼠引流淋巴結(jié)中的巨噬細(xì)胞；靜脈注射氯膦酸鹽脂質(zhì)體可以耗竭肝臟、脾、骨髓和血液中的巨噬細(xì)胞；鼻腔吸入或者氣管可以清除肺臟巨噬細(xì)胞，尤其肺泡巨噬細(xì)胞。氯膦酸鹽脂質(zhì)體對(duì)巨噬細(xì)胞耗竭維持時(shí)間是一過性。清除達(dá)峰后，顧上還會(huì)源源不斷的補(bǔ)充。為了達(dá)到較長期限清除巨噬細(xì)胞的目的，需要采用多次注射的方式來解決。但是，長期多次的注射，對(duì)注射方式也是考驗(yàn)，此外，機(jī)體體內(nèi)，是否有代償反應(yīng)，也需要關(guān)注。