線栓法MCAO大鼠腦缺血模型的拴線使用制備技巧

背景介紹

大鼠MCAO模型，不成功的一個常見原因，就是栓線插入深度不夠，即栓線的前端未進入大腦前動脈（ACA），拴線的粗細倒是次要的，0.20～0.26mm均可。因此，保證栓線進入ACA并阻斷對側來的血流，而又不刺破血管是重中之重。

如圖1尼龍線光滑的末端，不僅大大減輕了插線對血管內皮的損傷，降低了刺穿血管的可能性，而且可以更嚴密的阻斷從大腦前動脈供應的來自對側的血流，更為可貴的是，因為球端直徑為0.32mm，插線時可以非常方便的插到位（如圖2）。

制備技巧

技巧1：許多文獻報道插入深度為18.5±0.5mm（270g左右大鼠），如果按這一標準去做，而不考慮大鼠的個體差異，后果是缺血的程度參差不齊，很多大鼠會出現(xiàn)癥狀較輕，甚至無癥狀。建議當插線近18mm（做上標記）時，注意手的感覺，輕緩推進，直至感覺到阻力為止（當遇到阻力后，再插線會見到線彎曲）。可能有人會說，把血管插破了也未感覺到阻力或線遇阻后的彎曲。一個原因是線太硬（建議選擇Doccol），另一主要原因是當栓線從血管切口插入后為防止血液從此處流出，需要結扎一條細線，這條線結扎的松緊程度很關鍵，應在不流血的情況下盡可能的松，這樣你會發(fā)現(xiàn)進線時很輕松，一旦遇到阻力，就會感覺到。后者至關重要，請體會，就是常說的手法或者手感。

技巧2：栓線一旦進入ACA，就要把上面提到的那根細線適度扎緊（“適度"很重要，會影響到再灌流時大鼠的生死存亡），此時的關鍵是動作輕柔，不要使ICA有任何的牽拉，否則栓線會脫出ACA，可能會造成缺血失敗。血管外的栓線不要留得過長，更不要縫在皮外，大鼠醒來后會自己拔出。